Maximiser la précision des pipettes

L’un des outils les plus fréquemment utilisés dans un laboratoire typique est la pipette à déplacement d’air ou à coussin d’air. Pratiques et faciles à utiliser, les embouts de pipette à usage unique minimisent les risques de contamination croisée entre les échantillons.

Savez-vous comment choisir la bonne taille de pipette pour une précision maximale? Examinons d’abord la mécanique.

Les pipettes à déplacement d’air reposent sur un concept simple :

• Un piston de diamètre constant est poussé à travers un joint pour déplacer une colonne d’air; le mouvement de l’air déplace à son tour les liquides dans et hors de l’embout de la pipette jetable
• Un coussin d’air existe à l’intérieur de la l’embout de la pipette entre le liquide et l’extrémité de la pipette; le liquide ne touche jamais la pipette elle-même
• Après la fixation d’un embout de pipette, le piston est déplacé de sa position de repos et à travers le joint du piston pour pousser l’air hors de l’embout de la pipette
• La pointe est ensuite immergée juste en dessous la surface du liquide à aspirer; le piston à ressort est ramené à sa position de repos, créant un vide qui remplit la pointe de la pipette avec le liquide
• Les pipettes à volume réglable utilisent un mécanisme à vis pour modifier la longueur de course pour régler le volume à 50 % de la capacité nominale

Pour les pipettes dont le volume nominal est de 100 µL ou plus, l’imprécision d’une pipette à déplacement d’air est traitée comme un volume constant sur toute la plage de la pipette. La norme ISO 8655 partie 2 liste cette valeur à ≤± 0,8 % de la capacité nominale (soit ≤± 0,8 µL pour une pipette de 100 µL) et dépend principalement de la mécanique de la pipette. Pour des volumes plus petits, l’imprécision augmente en raison de la compressibilité de l’air et d’autres facteurs.

Généralement, les fiches techniques ou les catalogues de pipettes présentent la précision sous forme de pourcentage du volume nominal, souvent sans informations supplémentaires, de sorte que l’utilisateur doit déterminer les implications. Lors de l’estimation du pourcentage de précision pour les volumes partiels, le numérateur (la quantité d’inexactitude) reste le même; le dénominateur (le volume fixé) change.

Accuracy of Partial Volumes for a 100 µL Pipette

Il est clair qu’une pipette à déplacement d’air est plus précise à sa capacité nominale ou à proximité de celle-ci. En outre, la précision diminue considérablement lorsque le volume réglé descend en dessous de 50 % de la capacité nominale. C’est pourquoi la plupart des pipettes ont une plage de volume indiquée avec des limites de volume supérieures et inférieures.

La quantité de liquide à pipeter se situe souvent dans la gamme de plusieurs pipettes différentes. Par exemple, 20 µL peuvent être mesurés avec des pipettes de 2 à 20 µL, de 5 à 50 µL ou de 10 à 100 µL. Le volume sera plus précisément pipeté à l’aide de la pipette de 2 à 20 µL. Si cette taille n’est pas disponible, choisissez la pipette ayant la capacité la plus faible par rapport au volume dont vous avez besoin. Dans ce cas-ci, la pipette de 5 à 50 µL est un meilleur choix que celle qui mesure de 10 à 100 µL.

Si votre laboratoire dispose de pipettes dont les gammes ne se chevauchent que marginalement, l’ajout d’une ou deux pipettes supplémentaires avec un chevauchement plus important peut augmenter la précision de vos mesures.

La Transferpette S de BRAND est une pipette manuelle monocanal disponible en dix tailles différentes à volume réglable (0,1 à 1µL jusqu’à 1 à 10 ml); ces tailles couvrent presque toute la gamme de 0,5 µL à 10 ml, chevauchant les moitiés supérieures des gammes de pipettes. De même, les pipettes manuelles Transferpette à 8 et 12 canaux sont disponibles en cinq gammes de volumes réglables (0,5 à 10 µL à 30 à 300 µL) pour des volumes d’échantillon de volumes d’échantillons de 1 à 300 µL.

La Transferpette de BRAND est également disponible en version électronique avec des options similaires. Cinq pipettes électroniques Transferpette monocanal différentes couvrent des gammes de volumes allant de 0,5 à 10 µL à 250 µL à 5 ml; cinq modèles multicanaux couvrent des volumes allant de 0,5 à 10 µL à 15 à 300 µL.

REMARQUE : Dans la plupart des publications, le terme « précision » est utilisé pour désigner le degré d’imprécision. Pour rester cohérents avec les autres publications, nous utilisons le terme « précision » dans cet article lorsqu’il s’agit de pourcentages.

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