Produits chimiques pour les applications biopharmaceutiques LC-MS
Les techniques LC-MS, qui couplent la chromatographie liquide (LC) à la spectrométrie de masse (MS), deviennent de plus en plus la méthode de choix pour la caractérisation des médicaments biopharmaceutiques. Les solvants et les réactifs en phase mobile doivent avoir de faibles niveaux d’impuretés organiques afin de réduire les interférences lors des spectrométries de masse par ionisation par électronébuliseur (ESI) MS.
Procédés analytiques
Les médicaments biopharmaceutiques sont des protéines thérapeutiques de structure beaucoup plus complexe que les médicaments à petites molécules. Sur le plan structurel, les modifications post-traductionnelles des protéines, qui peuvent survenir à différentes étapes de la fabrication et de l’entreposage, peuvent avoir des répercussions sur l’efficacité et la sécurité des médicaments. Les modifications post-traductionnelles sont donc classées comme des attributs qualité critiques (CQA) et doivent être surveillées et contrôlées.
LC-MS est utilisée pour comprendre la structure des médicaments à base de protéines, notamment :
- Séquençages des acides aminés des peptides et des protéines
- Profils des protéines des cellules hôtes (HCP) et d’autres impuretés liées au processus
- Cartographie des liaisons disulfures
- Profils N-glycanes des anticorps monoclonaux (AcM)
- Séquençage oligonucléotide
La puissance combinée de la séparation LC et de la sensibilité et la spécificité de la détection MS fait de la méthode LC-MS le meilleur choix pour la cartographie des peptides pour détecter de multiples modifications post-traductionnelles, aussi appelée le flux de travail de méthode multiattribut (MAM). La séparation des différents peptides de la protéine thérapeutique digérée est critique pour le flux de travail MAM. On atteint généralement cette séparation en utilisant un long gradient LC d’eau et d’acétonitrile, avec de l’acide formique ajouté comme transformateur. (Voir la figure 1.)
Gradient LC typique dans un flux de travail MAM pour la séparation des peptides d’AcM NIST à l’aide d’une phase mobile binaire : B : 0,1 % d’acide formique dans de l’acétonitrile (cat. no LS120).
Solvants et réactifs de haute pureté
Les solvants Optima Fisher Chemical de grade LC-MS satisfont vos besoins pour les analyses LC-MS. Les mélanges LC-MS pratiques, prêts à être utilisés sont préparés avec précision pour assurer l’uniformité entre les différents lots et ils sont testés pour la qualité avec l’analyse LC-MS. Les solvants Thermo Scientific de grande UHPLC-MS satisfont des spécifications encore plus strictes pour répondre aux besoins de vos analyses les plus exigeantes. Aussi bien les solvants et les mélanges LC-MS et UHPLC-MS sont testés pour confirmer leurs faibles niveaux d’impureté organique permettant de minimiser les interférences et la suppression d’ions.
Ces réactifs LC-MS haute pureté possèdent aussi de très faibles niveaux d’impuretés métalliques. Les impuretés de métaux traces peuvent causer une mauvaise forme de la crête et une diminution de la récupération lors de l’adsorption des ions métalliques dans le médium de la colonne. Le sodium (Na+), le potassium (K+) et les ions d’autres métaux alcalins sont attirés de manière électrostatique aux charges négatives du groupe carboxyle des acides aminés c-terminaux dans les peptides et les protéines ou le support polyanionique des oligonucléotides. Les adduits Na+ et K+ diminuent la sensibilité globale et mettent en péril l’identification des peptides.
Tous les produits chimiques Thermo Scientific de grade LC-MS contrôlent de manière stricte la contamination par les métaux pendant la fabrication, ce qui est confirmé par l’analyse ICP-MS. Le tableau 1 contient une comparaison des impuretés dans de l’eau prémélangée de grade LC-MS (avec 0,1 % d’acide formique) de quatre marques concurrentes.
Vous pouvez trouver les niveaux de pureté de chaque application LC-MS par le canal Fisher Scientific. Visitez les pages suivantes pour en savoir plus :
Tableau 1. Niveaux d’ions métalliques (ppb) dans de l’eau de grade LC-MS avec 0,1 % d’acide formique de quatre fournisseurs
| Ion métallique | N° de cat. LS118 | Compétiteur M | Compétiteur H | Compétiteur J |
|---|---|---|---|---|
| Na | ≤50 | ≤700 | ≤5,000 | ≤50 |
| K | ≤50 | ≤40 | ≤2,000 | ≤50 |
| Mg | ≤10 | ≤40 | ≤500 | ≤50 |
| Ca | ≤50 | ≤50 | ≤500 | ≤50 |
Solvants et mélanges
| Qualité | Description | Emballage | Quantité | N° de cat. |
|---|---|---|---|---|
Optima LC-MS | Acétonitrile | Bouteilles en verre jaune | 500 ml, 1 L, 2,5 L, 4 L | A955 |
| Méthanol | Bouteilles en verre jaune | 500 ml, 1 L, 2,5 L, 4 L | A456 | |
| Eau | Bouteilles en verre jaune | 500 ml, 1 L, 2,5 L, 4 L | W6 | |
| Propan-2-ol | Bouteilles en verre jaune | 500 ml, 1 L, 2,5 L, 4 L | A461 | |
UHPLC-MS | Acétonitrile | Bouteilles en verre transparentes | 1 L | A956-1 |
| Méthanol | Bouteilles en verre transparentes | 1 L | A458-1 | |
| Eau | Bouteilles en verre transparentes | 1 L | W8-1 | |
Mélanges LC-MS Optima | Acétonitrile avec 0,1 % d’acide formique | Bouteilles en verre jaune | 500 mL, 1 L, 2.5 L, 4 L | LS120 |
| Acétonitrile avec 20 % d’eau et 0,1 % d’acide formique | Bouteilles en verre jaune | 500 ml | LS122-500 | |
| Acétonitrile avec 0,1 % d’AGT | Bouteilles en verre jaune | 500 ml, 1 L, 2,5 L, 4 L | LS121 | |
| Acétonitrile avec 0,05 % d’AGT | Bouteilles en verre jaune | 4 L | LS1174 | |
| Eau avec 0,1 % d’acide formique | Bouteilles en verre jaune | 500 ml, 1 L, 2,5 L, 4 L | LS118 | |
| Eau avec 0,1 % d’AGT | Bouteilles en verre jaune | 500 ml, 1 L, 2,5 L, 4 L | LS119 | |
| Eau avec 0,05 % d’AGT | Bouteilles en verre jaune | 4 L | LS115-4 | |
Additifs LC-MS Optima | Acide formique | Bouteilles en polyéthylène | 50 ml | A117-50 |
| Ampoules | 0,5, 1, 2, 10 × 1 ml | A117 | ||
Acide acétique | Bouteilles en polyéthylène | 50 ml | A113-50 | |
| Ampoules | 0,5, 1, 2, 10 × 1 ml | A113 | ||
Acide trifluoroacétique | Bouteilles en verre jaune | 50 ml | A116-50 | |
| Ampoules | 0,5, 1, 2, 10 × 1 ml | A116 | ||
| Acétate d’ammonium | Bouteilles en verre | 50 g | A114-50 | |
| Formiate d’ammonium | Bouteilles en verre | 50 g | A115-50 |
Kit d’installation
| Description | N° de cat. |
|---|---|
Trousse d’installation de réactif UHPLC-MS pour les nouveaux systèmes LC-MS, comprend les éléments suivants :
| UHPLCMSKIT |
